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使用紫外可見分光光度計如何獲得準確的結果
更新時間:2018-03-05 點擊次數:3032
   為了獲得準確的研究結果,準確測得樣品溶液的吸光度是非常重要的。一般,分析結果的不可靠性與偶然誤差和系統誤差有關。偶然誤差影響測量的精密度,可通過足夠數量測量的統計處理來減少;系統誤差影響測量結果的準確度,可在大體相同實驗條件下,用比較一種物質的準確測量結果,使系統誤差統一起來。而紫外可見分光光度計的系統誤差(波長校正、分光光度計的慢散光、放大器的線性響應、暗電流和比色皿的光程)和操作誤差(溫度改變、儀器讀數、操作者的改變、使用物質的純度、稱量和濃度、pH)對測量吸光度的影響是可以檢查和校正的。關于操作誤差,多數情況下,通過嚴格按操作程序測量、儀器調零、準確稱量等來控制或減少這種誤差的產生。關于儀器的系統誤差,可通過對分光光度計的定期校正來克服,若所需準確度很高的測量,則必須天天校正。
  紫外可見分光光度計的校正方法
  小量的雜散光往往會引起較大的測量誤差,它的校正可用一個能*吸收某一波長單色光,且在其他波長吸收很弱的溶液。從這個溶液所表現的透光情況可推測雜散光的近似值。由雜散光帶來的偽吸收帶,亦可用Beer-Lambert定律來檢查,但用此定律檢查偽吸收帶誤差較大。由切斷范圍之外所表現的透射比可得出近似的雜散光百分數。若所含雜散光大于0.1%,應設法減低,或對測得的吸收光度進行校正。由雜散光引起的誤差與雜散輻射成正比,因此校正值很容易從化合物的近于正確的曲線計算而得。此外,還可用一個適當的濾光片,該濾光片在測定波長范圍內*透光,但吸收此范圍外的光波,由此來消除雜散光。

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